CRISPR/Cas9基因敲除技術服務 服務編號：SV1501
一. CRISPR/Cas9技術介紹
CRISPR/Cas9 是一種基于細菌天然免疫機制開發出的基因編輯技術，用于抵御病毒等外來物入侵的一種防御機制。經改造的CRISPR系統主要由Cas9蛋白和單鏈向導RNA（sgRNA）組成，其中sgRNA對靶序列進行特異性識別，Cas9蛋白負責對識別的靶序列進行切割，從而實現DNA的雙鏈斷裂。
DNA雙鏈斷裂后，細胞對DNA的損傷修復機制就會被激活。目前主要由兩種修復機制，非同源末端連接（NHEJ）修復和同源重組介導的修復（HDR）。沒有外源模板時，機體主要進行NHEJ修復。NHEJ修復過程中，會在切割位點隨機的進行缺失或插入堿基序列，導致DNA移碼突變，從而使基因不能正常表達。存在外源模板的情況下，機體會啟動HDR修復來實現基因的精準插入或者替換。
二．服務內容與流程
服務內容：
Tip: 請您填寫項目申請表，以便Bioss為您提供更好的技術服務。
服務流程：
1. 客戶提供需要敲除的指標信息，與公司商定具體的制備項目、數量和費用，雙方簽訂《委托CRISPR/Cas9基因敲除服務合同》。
2. 雙方確定合作細節，實驗過程中及時反饋實驗進程，并按照規定時間完成委托服務。并向客戶提供委托產品與實驗報告。
三．技術流程
1.RNP轉染法
2.質粒轉染法
四．案例結果展示
五．服務優勢
1. 兩種敲除方法（質粒法和RNP法）可供客戶選擇。
2. 每個靶標設計多條sgRNA，提供多種敲除策略，最大限度的提高的KO效率，提高蛋白水平的敲除概率。
3. 通過Sanger測序后，多種軟件分析編輯效率，提高編輯結果的準確性。
4. 不同的細胞系具有專屬的轉染方案，提高靶標編輯的效率。
